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    信号肽捕获系统的建立  CNKI文献

    细胞分泌性蛋白的分泌有赖于蛋白质N端的信号肽的存在。利用酵母建立了从cDNA文库中筛选编码信号肽的基因片段的遗传系统。为此,用一步基因破坏法对酿酒酵母EGY48基因组中的suc 2基因(编码酵母蔗糖转...

    孙强 王冀姝... 《遗传学报》 2001年04期 期刊

    关键词: 蔗糖转换酶 / 同源重组 / 信号肽 / 基因克隆

    下载(290)| 被引(13)

    小鼠牙髓干细胞培养及诱导分化  CNKI文献

    目的 :分离、培养小鼠牙髓干细胞并诱导分化 .方法 :采用酶消化培养法获得小鼠的单个牙髓细胞悬液 ,细胞密度调整为 1× 10 4/孔细胞 ,用 2 0 0mL·L -1胎牛血清的α MEM培养液培养 14d ,挑出细胞克隆消化传代...

    陆群 吴补领... 《第四军医大学学报》 2003年18期 期刊

    关键词: 干细胞 / 牙髓干细胞 / 细胞培养 / 分化

    下载(400)| 被引(11)

    蛋白转导结构域-bcr/abl融合基因的构建和表达  CNKI文献

    目的 构建含蛋白转导结构域 (PTD)与慢性粒细胞白血病 (CML)bcr/abl融合基因片段的质粒 ,并在大肠杆菌中表达。方法 PCR扩增的CMLbcr/abl基因片段 ,经DNA测序后 ,与合成编码PTD的DNA片段一起插入质粒pET 16b ,构建表...

    梁英民 孙强... 《中华血液学杂志》 2002年01期 期刊

    关键词: 转导 / 遗传 / 融合基因 / bcr/abl

    下载(134)| 被引(15)

    核定位信号筛选系统的构建  CNKI文献

    建立了一酵母克隆系统用于克隆含核定位信号 (NLS)的蛋白质的基因 .用表达转录因子GAL4 DNA结合域 - p53(GAL4- DBD- p53)融合蛋白的质粒转化酵母 HF7c,使 GAL4- DBD- p53可结合于报告基因的启动子但因无转录激活域而...

    王冀姝 陈萍... 《中国生物化学与分子生物学报》 2000年03期 期刊

    关键词: 核定位信号 / 出核信号 / 基因克隆 / 酵母

    下载(171)| 被引(9)

    PTD-bcr/abl融合癌蛋白片段的表达及其跨膜转运  CNKI文献

    目的探讨蛋白转导结构域(PTD)介导的转导bcr/abl癌蛋白片段的方法,为进行免疫治疗提供实验依据。方法合成编码PTD的基因片段,并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr/abl基因片段融合,在大肠杆菌中表达。将纯化的融...

    梁英民 孙强... 《细胞与分子免疫学杂志》 2001年04期 期刊

    关键词: 蛋白转导 / bcr/abl / 慢性粒细胞白血病 / 基因表达

    下载(74)| 被引(16)

    利用核定位信号筛选系统初步筛选小鼠胚胎核定位蛋白基因  CNKI文献

    在已建立的核定位信号 (nuclearlocalizationsignal,NLS)筛选系统的基础上 ,对这一系统进行了改进并对改进的系统进行了验证。将小鼠 1 1天胚胎cDNA文库插入改进后的筛选载体的多克隆位点 ,转化酵母宿主菌。然后将约 ...

    王冀姝 孙强... 《生物化学与生物物理学报》 2000年06期 期刊

    关键词: 核定位信号 / 小鼠 / 胚胎 / 基因克隆

    下载(98)| 被引(9)

    核定位信号筛选系统的构建和基因文库的筛选以及核定位蛋白...  CNKI文献

    转录因子及其它许多在细胞增殖、分化等方面发挥重要作用的蛋白如组蛋 白、DNA和RNA聚合酶、RNA加工蛋白等均在细胞核内发挥作用、大多数 核内蛋白需要内源性的核定位信号(nuclear localization...

    王冀姝 导师:韩骅 第四军医大学 2001-05-01 博士论文

    关键词: 核定位信号 / 出核信号 / 基因克隆 / 酵母

    下载(419)| 被引(0)

    LIM结构域蛋白KyoT相互作用分子的筛选  CNKI文献

    KyoT为LIM结构域蛋白 ,可与转录因子RBP Jk相互作用。为了研究其功能 ,用酵母双杂交法筛选了与KyoT相互作用的蛋白。以KyoT2为诱饵筛选人淋巴结cDNA文库 ,从 5× 10 6 个克隆中共获得 4 2个阳性克隆。提取质粒进行...

    李荣 王冀姝... 《遗传学报》 2002年02期 期刊

    关键词: LIM蛋白 / KyoT / PIAS1 / 酵母双杂交

    下载(73)| 被引(7)

    几种细胞因子对小鼠核糖体蛋白L6表达的调控  CNKI文献

    小鼠的核糖体蛋白RpL6启动子除了具有看家基因启动子的特点外 ,还含有多种转录因子的识别位点 .如GATA序列 1,γ干扰素核心序列 ,α干扰素应答序列 2等 ,提示RpL6的表达可为细胞外因子所诱导 .为了证实这一点 ,分别用...

    王冀姝 韩骅 《生物化学与生物物理进展》 2002年04期 期刊

    关键词: 核糖体蛋白RpL6 / 启动子 / 干扰素 / 促红细胞生成素

    下载(78)| 被引(4)

    suc2基因的克隆及在酵母基因组中的定位突变  CNKI文献

    目的 克隆酿酒酵母的蔗糖转换酶基因 (suc2 ) ,并定位突变酵母基因组中的 suc2基因以获得无蔗糖转换酶表达的酵母品系 .方法 用 PCR法从酵母 Y190基因组中扩增出suc2的成熟肽基因片段 ,克隆后测序 .将色氨酸合成酶 ...

    孙强 王冀姝... 《第四军医大学学报》 2000年12期 期刊

    关键词: 蔗糖转换酶 / 同源重组 / (V)突变 / (V)信号肽

    下载(101)| 被引(4)

    细胞内分布克隆——一种新的功能性基因克隆方法  CNKI文献

    明确蛋白质的细胞内定位对了解蛋白质的功能有很强的提示作用。近年来随着对蛋白质细胞内定位信号和转运机理的深入了解,建立了根据蛋白质分子在细胞内的特殊定位进行快速功能性基因克隆的方法,即细胞内分布克隆。其筛...

    王冀姝 王莉... 《生命的化学》 2002年06期 期刊

    关键词: 细胞内定位 / 基因克隆

    下载(203)| 被引(1)

    核糖体蛋白L6/Taxreb107的核定位信号的分析  CNKI文献

    核糖体蛋白L6 (RpL6 ,Taxreb10 7)含有三个具有核定位信号特征的基序 .用作者构建的核定位信号捕获系统分析了这些核定位信号是否具有介导蛋白质进行核转位的功能 .将RpL6 /Taxreb10 7分段插入核定位信号捕获载体的克...

    王冀姝 杨曦... 《生物化学与生物物理进展》 2002年01期 期刊

    关键词: 核定位信号 / 核糖体蛋白L6 / 核转位 / 绿色荧光蛋白

    下载(155)| 被引(1)

    逆转录病毒转导的重组酶Cre在体外对LoxP标记的小鼠骨髓细胞...  CNKI文献

    目的 :研究逆转录病毒体系转导的重组酶Cre在体外对LoxP标记的基因组进行重组的能力 .方法 :用逆转录病毒表达Cre,体外感染条件性基因剔除 (即LoxP标记的基因 )小鼠来源的原代培养的骨髓细胞 .从被感染的骨髓细胞中提...

    陆群 吴补领... 《第四军医大学学报》 2003年09期 期刊

    关键词: Cre重组酶 / 条件性基因剔除 / 逆转录病毒

    下载(159)| 被引(1)

    重组酶Cre在体外对LoxP标记的基因组进行重组的初步研究  CNKI文献

    目的 :研究逆转录病毒体系转导的重组酶Cre在体外对LoxP标记的基因组进行重组的能力。方法 :用逆转录病毒表达Cre ,体外感染条件性基因剔除 (即LoxP标记的基因 )小鼠来源的原代培养的牙乳头间充质细胞。从被感染的牙乳...

    陆群 吴补领... 《牙体牙髓牙周病学杂志》 2002年03期 期刊

    关键词: Cre / 条件性基因剔除 / 逆转录病毒

    下载(161)| 被引(1)

    LIM结构域蛋白KyoT在成年小鼠睾丸的表达  CNKI文献

    报道了KyoT在成年小鼠体内的表达 ,以便进一步研究KyoT在体内的功能。为研究KyoTmRNA及蛋白质水平的表达 ,采用Northern印迹、RT PCR、免疫组织化学SABC和原位杂交方法。睾丸中两种KyoT的mR NA水平均很高 ,睾丸间质细...

    李荣 黄威权... 《生物化学与生物物理学报》 2001年04期 期刊

    关键词: KyoT / 睾丸 / 间质细胞 / 小鼠

    下载(38)| 被引(5)

    HTLV-1转录激活因子Tax和Taxreb107的相互作用  CNKI文献

    Tax是人类T淋巴细胞白血病病毒编码的转录因子。核糖体蛋白RpL6又称Taxreb10 7,是Tax应答序列结合蛋白 ,二者均作用于HTLV 1的启动子LTR。用酵母双杂交法和GST下拉检测 (pull down)法研究了Tax和Taxreb10 7/RpL6之间的...

    杨曦 王冀姝... 《生物化学与生物物理学报》 2002年02期 期刊

    关键词: Tax / Taxreb107/RpL6 / HTLV-1 / 酵母双杂交

    下载(65)| 被引(2)

    LIM结构域蛋白KyoT基因剔除小鼠的建立和表型分析  CNKI文献

    KyoT为一LIM结构域蛋白,可与转录因子RBP-Jk相互作用而调节其转录活性.构建了KyoT基因剔除载体,转染小鼠胚胎干细胞(ES细胞)后得到同源重组的ES细胞克隆.将此ES细胞注射入小鼠的囊胚泡得到嵌合小鼠,再经小鼠培育得到K...

    韩骅 王冀姝... 《自然科学进展》 2001年02期 期刊

    关键词: KyoT基因 / 基因剔除 / B淋巴细胞

    下载(64)| 被引(2)

    重组酶Cre的逆转录病毒载体的构建及鉴定  CNKI文献

    目的 构建表达重组酶 Cre的逆转录病毒载体并进行初步的体外感染研究 .方法 将 Cre基因片段插入到逆转录病毒载体 p Mx- IRES- GFP中 ,转染包装细胞系获得表达Cre的病毒颗粒 ,体外感染 NIH- 3T3细胞 ,通过绿色荧光蛋...

    陆群 吴补领... 《第四军医大学学报》 2002年05期 期刊

    关键词: 重组 / 遗传 / 基因剔除 / 逆转录病毒

    下载(90)| 被引(0)

    小鼠Notch1胞外段高抗原区编码基因的克隆与表达  CNKI文献

    目的 :克隆小鼠Notch1胞外段高抗原区编码基因 ,并进行原核表达及蛋白纯化 ,为制备mNotch1的单克隆抗体做准备。方法 :计算机分析小鼠Notch1全长 ,PCR扩增其胞外段高抗原区编码基因 ,克隆入载体T -vector进行序列测定...

    黄红艳 柳天平... 《牙体牙髓牙周病学杂志》 2002年03期 期刊

    关键词: Notch1 / 基因克隆 / 原核表达 / 蛋白纯化

    下载(29)| 被引(0)

    带有蛋白转导结构域的bcr/abl癌蛋白片段表达及其跨膜转运  CNKI文献

    0 引言 人类免疫缺陷病毒 (human immunodeficiencyvirus,HIV) - 1编码的反式激活蛋白 TAT具有独特的跨膜运转方式 ,而且有转导速度快 ,效率高的特点 ,被称为蛋白转导结构域 (protein transduction

    梁英民 孙强... 《第四军医大学学报》 2001年07期 期刊

    关键词: 蛋白转导 / bcr/abl / 慢性粒细胞白血病 / 基因表达

    下载(44)| 被引(0)

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