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    重组人胸腺素β_4基因的克隆、表达、纯化、鉴定及活性检测  CNKI文献

    目的:利用基因工程的方法原核表达重组人胸腺素β4(Tβ4)并对其进行纯化和鉴定.方法:使用大肠杆菌偏爱密码子合成人Tβ4全长基因,构建了Tβ4的二串联体基因(Tβ4②),将其克隆入表达载体pET-22b(+)中,重组质粒转化大肠...

    张珍 游颜杰... 《第四军医大学学报》 2008年16期 期刊

    关键词: 胸腺素β4 / 串联重复序列 / 克隆 / 分子

    下载(300)| 被引(14)

    胸腺素α_1 基因的克隆表达及其生物活性  CNKI文献

    胸腺素α1(thymosinalpha 1 ,Tα1)作为一种免疫增强剂 ,临床用途广泛 .为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成Tα1基因 ,克隆于质粒pUC1 9的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .经测序证明序列正确后 ,串联为 4串体 (Tα1④ ) ,经...

    石继红 张英起... 《中国生物化学与分子生物学报》 2001年03期 期刊

    关键词: 胸腺素α1 / 基因克隆 / 融合表达 / 蛋白质纯化

    下载(157)| 被引(26)

    应用基因工程方法制备新型重组人肿瘤坏死因子-α  CNKI文献

    目的 应用基因工程技术 ,制备一种新型的重组人肿瘤坏死因子 α (novelrecombinanthumantumornecrosisfactor α ,nrhTNF α) ,并对其生物学活性、理化性质进行鉴定 ,为进入临床前研究提供基础。方法 应用PCR技术 ...

    张英起 赵宁... 《细胞与分子免疫学杂志》 2002年04期 期刊

    关键词: 重组人肿瘤坏死因子α / 基因表达 / 大肠杆菌

    下载(228)| 被引(18)

    导向性人干扰素α2a工程菌的高密度发酵  CNKI文献

    目的 :优化大肠杆菌表达导向性人干扰素α2a的中试发酵工艺 ,以获得工程菌的高密度发酵和目的蛋白的高表达 .方法 :采用发酵罐发酵 ,对影响工程菌生长和目的蛋白表达的条件 ,如pH值、活化时间、诱导时间、溶氧范围及补...

    孟洁如 颜真... 《第四军医大学学报》 2004年23期 期刊

    关键词: 发酵 / 干扰素 / 大肠杆菌

    下载(213)| 被引(15)

    抗Dysbindin-1多肽双抗夹心ELISA的建立及在肝癌中的应用  CNKI文献

    目的:制备抗人Dysbindin-1特异性单克隆抗体,建立DAS-ELISA检测体系,并初步应用于肝癌血清的检测。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗Dysbindin-1单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和SDS-P...

    谢姣贵 王毅超... 《现代生物医学进展》 2016年11期 期刊

    关键词: Dysbindin-1 / 单克隆抗体 / DAS-ELISA / 肝癌

    下载(70)| 被引(0)

    内含肽介导的重组人干扰素α2a的原核表达及其生物学活性  CNKI文献

    目的原核表达内含肽介导的重组人干扰素α2a(rhIFNα2a)融合蛋白,并检测其生物学活性。方法以质粒pBV220-IFN-α2a为模板PCR扩增rhIFNα2a基因,将其插入原核表达载体pTWIN1的内含肽Ssp DnaB基因下游的多克隆位点,构建...

    万一 张琨... 《中国生物制品学杂志》 2013年02期 期刊

    关键词: 干扰素α2a / 原核细胞 / 基因表达 / 内含肽

    下载(241)| 被引(0)

    大肠杆菌表达人新型肿瘤坏死因子的纯化  CNKI文献

    目的:制备符合临床要求的高纯度新型人肿瘤坏死因子(nhTNF),建立简单、高效的纯化途径.方法:用本室构建的nhTNF基因工程菌,经发酵、收菌、裂菌、硫酸铵盐析,Q-Sepharose及S-Sepha...

    杨辉 张英起... 《第四军医大学学报》 1997年03期 期刊

    关键词: 肿瘤坏死因子 / 液相色谱法 / 蛋白质纯化

    下载(139)| 被引(16)

    胸腺素α_1-硫氧还蛋白融合蛋白基因的表达及其生物学功能的...  CNKI文献

    胸腺素α1(thymosinalpha 1,Tα1)作为一种免疫增强剂 ,临床用途广泛。为了大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子用人工方法合成Tα1基因 ,克隆于 pUC19的EcoRI和PstI位点 ,经测序证明序列正确后 ,串联为 4串体 (Tα1④...

    赵永同 石继红... 《药物生物技术》 2001年02期 期刊

    关键词: 胸腺素α1 / 硫氧还蛋白 / 基因克隆 / 融合表达

    下载(117)| 被引(12)

    多发性创伤后血清TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-10变化的连续观...  CNKI文献

    目的 探讨创伤患者TNF -α、IL - 1β、IL - 6及IL - 10血清浓度的变化及临床意义。 方法  2 5例多发性创伤患者分别在受伤后第 2、3、5、10及 15天测定外周血清TNF -α、IL - 1β、IL - 6及IL - 10的变化 ,并与正常...

    张永和 赵宁... 《中国急救医学》 2002年03期 期刊

    关键词: 多发性创伤 / TNF-α / IL-1β / IL-6

    下载(141)| 被引(18)

    一种检测可溶性白细胞介素2受体夹心法ELISA的建立  CNKI文献

    采用两种识别不同表位的小鼠抗人白细胞介素2受体(IL-2R)单克隆抗体(McAb),在国内首次建立了检测可溶性IL-2R(sIL-2R)的夹心法ELISA,并进行了初步应用。结果显示:本法特异性强、敏感性高、重复性好、操作简便,能检出正...

    孙忱 朱勇... 《中国免疫学杂志》 1991年06期 期刊

    关键词: 可溶性白细胞介素2受体 / 夹心法ELISA / 单克隆抗体

    下载(71)| 被引(48)

    胎盘免疫调节因子理化性质及生物学活性的实验研究  CNKI文献

    本文报道了胎盘免疫调节因子(PF)的制备,并对其理化性质及生物学活性作了较全面的实验研究。结果表明,PF为核苷酸和肽类,分子量为3800~5000道尔顿,无蛋白质反应及毒副作用,性质较稳定。其生物学活性类似于转移因子、...

    李恩善 董邦全... 《上海免疫学杂志》 1993年04期 期刊

    关键词: 胎盘免疫调节因子 / 核苷酸 / 肽类 / 免疫增强剂

    下载(84)| 被引(43)

    重组胸腺素α1的纯化及活性  CNKI文献

    将胸腺素α1基因 4串体克隆于 pThioHisA融合表达载体 (pThioHisA Tα1④ ) ,转化大肠杆菌TOP10。在IPTG诱导下 ,融合蛋白得到了高效表达。SDS PAGE分析确定诱导表达的融合蛋白占菌体总蛋白的 40 % ,且表达的融合蛋白...

    石继红 张英起... 《生物工程学报》 2000年06期 期刊

    关键词: 胸腺素α1 / 融合表达 / 蛋白质纯化 / 生物活性

    下载(122)| 被引(10)

    RGD特异性结合多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因的克隆...  CNKI文献

    目的构建RGD多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因,进一步提高rmhTNF的临床疗效。方法应用基因重组技术构建了CRGDC与rmhTNF的融合基因,在E.coliDH5α中诱导表达重组蛋白RGDrmhTNF,采用溶菌酶法裂解菌体,裂解上清经硫...

    王慧 颜真... 《中国生物制品学杂志》 2005年03期 期刊

    关键词: 肿瘤坏死因子 / 肿瘤导向肽 / 抑瘤活性

    下载(137)| 被引(5)

    利用恒溶氧-补料分批技术高密度培养大肠杆菌生产重组肿瘤导...  CNKI文献

    目的 探讨重组肿瘤导向多肽 L TL - TNF工程菌的大规模培养与表达方法以获取重组 L TL TNF.方法 首先在试管和三角瓶中探讨工程菌的生长和表达规律 ,筛选其最适宿主菌、最佳培养及诱导表达条件 ,然后在 5 L 自控发酵...

    颜真 张英起... 《第四军医大学学报》 2001年14期 期刊

    关键词: 重组 / 遗传 / 大肠杆菌 / 发酵

    下载(179)| 被引(6)

    气压致离体中枢神经细胞损伤模型  CNKI文献

    目的 建立一种空气高压力方法导致体外培养神经细胞的损伤模型 ,用于中枢神经系统各个细胞群及单个细胞在损伤中反应的研究 .方法 在空气高压的状态下致神经细胞损伤 ,并利用碘化丙啶 (PI)荧光探针不能穿过正常的细...

    张永和 赵宁... 《第四军医大学学报》 2002年05期 期刊

    关键词: 细胞损伤模型 / 空气压力 / 碘化丙啶 / 乳酸脱氢酶

    下载(115)| 被引(10)

    用于构建抗人TNF嵌合抗体的鼠单克隆抗体中和活性的鉴定  CNKI文献

    目的:筛选构建抗人TNF嵌合抗体所需高质量的鼠源性mAb。方法:从一组分泌抗人TNF mAb杂交瘤细胞中,挑取3株D2、E6和F6,按常规方法制备腹水。用饱和硫酸铵盐析后,分别用蛋白A亲和层析和QFF阴离子交换层析法,纯化D2株分泌...

    朱参胜 欧阳为明... 《细胞与分子免疫学杂志》 2003年06期 期刊

    关键词: TNF / mAb / 中和活性 / 嵌合抗体

    下载(107)| 被引(7)

    新型基因工程人肿瘤坏死因子-α的临床前研究  CNKI文献

    目的  研究一种新型基因工程人肿瘤坏死因子-α(nrhTNF-α)的临床前药理、毒理和药代动力学特性。方法观察nrhTNF-α对动物移植性肿瘤的抑制作用、毒副作用(如急性中毒反应和死亡情况,过敏反应,...

    赵宁 张英起... 《细胞与分子免疫学杂志》 2002年02期 期刊

    关键词: 新型基因工程人肿瘤坏死因子-α / 药效 / 毒理 / 药理

    下载(107)| 被引(8)

    导向性人干扰素α2a工程菌生物学特性的稳定性  CNKI文献

    目的 全面观察了解pBV220-IFNN/DH5α工程菌生物学特性的稳定性。方法 工程菌菌株连续传至50代后,进行质粒性状、扫描电镜观察、干扰素表达水平、革兰氏染色及各项生化反应检测。结果 pBV220-IF-NN/DH5α工程菌呈现典...

    孟洁如 颜真... 《中国生物制品学杂志》 2003年04期 期刊

    关键词: 干扰素 / 重组工程菌株 / 生物学特性 / 稳定性

    下载(81)| 被引(11)

    小鼠注射新型重组人肿瘤坏死因子的药代动力学  CNKI文献

    目的 研究新型重组人肿瘤坏死因子 (nrh TNFα)在小鼠体内的药代动力学 .方法 给小鼠按 10 ,2 0和 40μg·kg- 1 剂量 im nrh TNFα后 ,不同时间点采血 ,分离血清 ,采用高效液相色谱法 (HPL C)分离结合同位素法...

    刘昌孝 陈拯民... 《第四军医大学学报》 2002年03期 期刊

    关键词: 肿瘤坏死因子α / 药代动力学 / 高效液相色谱法 / 酶联免疫法

    下载(130)| 被引(6)

    胸腺素α_1的生化特性及生物学活性的分析  CNKI文献

    目的 :建立确定胸腺素α1纯度、分子量和等电点等生化特性和生物学活性检测的方法。方法 :应用高效液相色谱、三羟甲基甘氨酸 -SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦 -聚丙烯酰胺凝胶电泳和3H -TdR掺入法 ,在致有丝分裂...

    石继红 张英起... 《药物分析杂志》 2001年04期 期刊

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