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    CNKI为你找到相关结果

    乳酸菌破壁方法的比较研究  CNKI文献

    本实验旨在探索一种快速、高效、经济的乳酸菌破壁方法。通过甘氨酸破壁法、反复冻融破壁法、溶菌酶破壁法、氧化锆珠破壁法、超声波破壁法以及3种复合破壁法对植物乳杆菌Lactobacillus.plantarum 1.557进行破壁处理,...

    潘荣荣 王茂鹏... 《食品工业科技》 2017年12期 期刊

    关键词: 乳酸菌 / 破壁方法 / 氧化锆珠 / 蛋白提取

    下载(316)| 被引(8)

    乳酸乳球菌高效电转化方法的建立  CNKI文献

    以乳酸菌诱导型表达质粒pNZ8149为载体,Lactococcus lactis NZ3900为受体,采用电转化方法研究电场强度、电击杯规格、受体菌株的生长状态、感受态细胞浓度及分装体积、质粒浓度、电击脉冲时间以及电击杯使用次数等因素...

    任大勇 李昌... 《中国兽药杂志》 2012年01期 期刊

    关键词: 乳酸乳球菌 / 电转化 / 转化效率 / 感受态细胞

    下载(500)| 被引(12)

    乳酸菌表达CRISPR gRNA载体的构建与鉴定  CNKI文献

    [目的]构建并筛选重组gRNA(向导RNA)表达质粒p SJCR-LDH和p SJCR-C9PX,并对gRNA在乳酸菌中的表达进行鉴定。[方法]通过PCR技术扩增复制子SH71、氯霉素抗性基因CM和gRNA表达盒片段。将CM片段分别与gRNA表达盒进行融合,...

    邸洋 王茂鹏... 《生物技术》 2017年01期 期刊

    关键词: 乳酸菌 / 基因编辑 / 重组表达质粒 / gRNA

    下载(625)| 被引(2)

    基于Tet-On 3G的IFITM3诱导表达MDCK细胞系的建立及功能分析  CNKI文献

    利用Tet-On 3G系统构建了含人IFITM3基因的真核表达质粒pTRE3G-IFITM3,并将其与调控质粒pLVX-Tet3G共转染犬肾细胞(MDCK),转染后48 h用G418和嘌呤霉素进行筛选,用多西环素(Dox)对获得的细胞系进行诱导表达鉴定,并进行...

    曹婷婷 杜寿文... 《高等学校化学学报》 2017年05期 期刊

    关键词: 干扰素诱导跨膜蛋白3 / 干扰素刺激基因 / 诱导表达 / 病毒进入

    下载(124)| 被引(2)

    稳定表达人IFITM3的A549细胞株建立及其对禽流感病毒感染的...  CNKI文献

    目的:为深入研究IFITM3抗禽流感病毒作用及其分子机制提供细胞模型,建立稳定表达人IFITM3蛋白的A549细胞株。方法:首先合成引物,分离人外周血单个核细胞,PCR扩增IFITM3基因,进行DNA测序分析。测序正确后,将其克隆至慢...

    姜颖越 杜寿文... 《中国免疫学杂志》 2016年03期 期刊

    关键词: 干扰素诱导跨膜蛋白3 / 稳定表达 / 禽流感病毒 / 抑制作用

    下载(200)| 被引(1)

    牛干扰素诱导跨膜蛋白基因的克隆、序列分析及表达  CNKI文献

    参照GenBank中牛干扰素诱导跨膜蛋白(bIFITMs)编码序列设计上、下游引物,通过RT-PCR技术扩增目的序列。将扩增产物连接至pMD18-T载体上,测序,使用DNAStar、DNA MAN、MEGA6.0等生物信息学软件对其进行核苷酸、氨基酸序...

    谭鹏 杜寿文... 《中国兽医学报》 2015年03期 期刊

    关键词: 牛干扰素诱导跨膜蛋白 / 序列分析 / 真核表达

    下载(150)| 被引(2)

    表达HIV-1 gag重组鸡痘病毒的构建与筛选  CNKI文献

    构建并筛选表达HIV-1 gag蛋白的重组鸡痘病毒,并对其进行鉴定。首先设计引物通过PCR技术扩增HIV-1 gag基因,将其连接到pMD18-T载体上,测序正确后将其克隆入本实验室自行构建的鸡痘病毒穿梭载体pTKET中,获得重组质粒pT...

    朱羿龙 李昌... 《中国生物工程杂志》 2014年01期 期刊

    关键词: 重组鸡痘病毒 / HIV-1 / gag / 强型荧光蛋白

    下载(180)| 被引(3)

    IFITM3基因的克隆及其在真核细胞中的表达与定位研究  CNKI文献

    目的:干扰素rhIFN-α2B体外诱导人胚胎肾细胞系293T细胞获得IFITM3基因,观察IFITM3基因在293T细胞中的表达与定位。方法:利用干扰素rhIFN-α2B体外诱导293T细胞获得IFITM3基因,采用RT-PCR技术扩增获得干扰素诱导的跨膜...

    朱娜 李昌... 《中国免疫学杂志》 2012年11期 期刊

    关键词: IFITM3 / 克隆 / 表达 / 定位

    下载(287)| 被引(4)

    牛干扰素诱导跨膜蛋白3对口蹄疫病毒感染的抑制作用  CNKI文献

    为了研究牛干扰素诱导跨膜蛋白3(bIFITM3)对O型口蹄疫病毒(FMDV)的抑制作用,本试验将表达bIFITM3的重组质粒pLV-bIFITM3和表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的对照质粒pLV-EGFP分别转染BHK-21细胞,通过嘌呤霉素抗性筛选获...

    赵飞 杜寿文... 《中国兽医学报》 2016年12期 期刊

    关键词: 牛干扰素诱导跨膜蛋白3 / 口蹄疫病毒 / BHK-21细胞

    下载(74)| 被引(2)

    HIV-1包膜蛋白ENV慢病毒载体的构建及表达  CNKI文献

    目的:构建表达HIV-1包膜蛋白ENV的慢病毒载体,感染人胚肾细胞HEK293T,观察env基因在HEK293T中的表达。方法:通过点突变获得HIV-1 env完整基因,将env基因亚克隆至慢病毒穿梭载体pLVX-IRES-ZsGreen1的EcoRⅠ、XhoⅠ位点...

    孙丹丹 李昌... 《中国免疫学杂志》 2012年05期 期刊

    关键词: ENV / HIV-1 / 慢病毒载体 / 真核表达

    下载(229)| 被引(5)

    表达基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白的重组鸡痘病毒的构建和筛选  CNKI文献

    为了构建并筛选表达新城疫病毒(NDV)F蛋白的重组鸡痘病毒(rFPV-F),通过PCR扩增F基因,克隆至pMD18-T Simple载体,进行DNA序列分析和遗传进化关系分析。将测序正确的F基因克隆至笔者所在实验室自行构建的新型鸡痘病毒穿...

    辛舒 田明尧... 《中国兽医科学》 2015年03期 期刊

    关键词: 新城疫病毒 / 基因Ⅶ型 / F蛋白 / 鸡痘病毒穿梭载体

    下载(147)| 被引(2)

    猪肺巨噬细胞源IFN-λ1的分子克隆、表达与活性分析  CNKI文献

    Ⅲ型干扰素(interferon lambda,IFN-λ)在机体抗病毒固有免疫、适应性免疫、黏膜免疫及抗肿瘤免疫等方面发挥重要作用。本研究利用RT-PCR技术从猪肺巨噬细胞CRL2845中扩增获得猪IFN-λ1基因(pIFN-λ1),并进行遗传进化...

    许汪 杜寿文... 《中国兽医学报》 2018年04期 期刊

    关键词: 猪IFNλ1 / 猪肺巨噬细胞 / 干扰素刺激基因 / 抗病毒活性

    下载(86)| 被引(2)

    乳酸菌氧化锆珠破壁方法的优化及适用性研究  CNKI文献

    本实验旨在优化氧化锆珠破壁方法,以期筛选出较佳的破壁条件,提高蛋白得率。实验在菌体重量、研磨buffer和研磨时间这3方面对该破壁方法进行了优化,并通过SDS-PAGE来分析其破壁效果。在优化后的条件下,同时对6株乳酸菌...

    潘荣荣 王茂鹏... 《食品工业科技》 2017年11期 期刊

    关键词: 乳酸菌 / 氧化锆珠 / 优化 / 适用性

    下载(84)| 被引(1)

    口服疫苗抗原递送载体Lactococcus lactis NZ9000研究进展  CNKI文献

    综述了基因工程菌Lactococcus lactis NZ9000在基因组学、安全性、功能性、疫苗载体构建、菌株改造等方面的研究进展,对NZ9000作为口服疫苗载体的表达系统进行了评述,展望了其在生物制药、疫苗开发和食品工业等领域的...

    任大勇 李昌... 《中国兽药杂志》 2012年06期 期刊

    关键词: 口服疫苗 / 递送载体 / 乳酸乳球菌NZ9000

    下载(225)| 被引(4)

    IFITM2的克隆表达及其抗病毒作用初探  CNKI文献

    目的:构建含有ifitm2基因的重组质粒,在人胚肾HEK293T细胞中表达,并验证IFITM2蛋白的抗病毒作用。方法:参照Genbank ifitm2基因序列,设计上下游引物,通过RT-PCR技术扩增ifitm2基因,并将扩增产物连接至pMD18-T-sim-ple...

    李沂 李昌... 《中国免疫学杂志》 2013年06期 期刊

    关键词: IFITM2 / 克隆表达 / 抗病毒作用

    下载(164)| 被引(2)

    PCV3 Cap基因在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定  CNKI文献

    试验旨在获得具有天然构象且反应原性良好的猪圆环病毒3型(porcine circoviurs 3,PCV3)Cap蛋白。以本实验室保存的PCV3 Cap基因为模板,设计不同引物扩增Cap基因,将其亚克隆至pEASY-Blunt载体上,验证正确后将目的基因分...

    姜宇航 徐一鸣... 《中国兽医学报》 2019年11期 期刊

    关键词: 猪圆环病毒3型 / 重组杆状病毒 / Cap蛋白 / 表达

    下载(26)| 被引(0)

    表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒实时荧光定量PCR检测方...  CNKI文献

    采用荧光染料SYBR Green渗入法,通过对real-time PCR反应条件进行优化,建立了real-timePCR检测方法,用该方法定量分析新城疫病毒(NDV)F基因在重组鸡痘病毒(rFPV-F-VP0)第1、5、10、15、20代次中的表达整合情况。结果表...

    任静强 朱战波... 《中国兽医科学》 2011年03期 期刊

    关键词: 新城疫病毒 / F基因 / SYBR / Green

    下载(195)| 被引(3)

    缺失E3L基因减毒天坛株痘苗病毒的构建及筛选  CNKI文献

    通过在E3L同源重组臂中插入含有增强型痘苗病毒早晚期启动子(pE/L)、增强型绿色荧光蛋白基因和同向Loxp(Locus of X-over P1)序列的表达盒构建穿梭质粒pTE-EGFP。利用pTE-EGFP和野生型天坛株痘苗病毒共转染仓鼠肾细胞...

    王宇航 李霄... 《中国兽医学报》 2011年11期 期刊

    关键词: 天坛株痘苗病毒 / 减毒病毒 / E3L / Cre/Loxp系统

    下载(88)| 被引(8)

    HIV-1 B亚型假病毒的制备与鉴定  CNKI文献

    目的制备携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和ENV包膜蛋白的HIV-1 B亚型假病毒用于感染研究,并建立可行的鉴定方法。方法双质粒共转染HEK293T细胞后收获病毒上清,TRIzol法提取病毒基因组并采用RT-PCR进行报告基因扩增,W...

    王茂鹏 李昌... 《军事医学》 2014年01期 期刊

    关键词: HIV-1 / B亚型假病毒 / 感染 / 鉴定方法

    下载(208)| 被引(2)

    HIV复合表位DNA重组体和痘苗病毒疫苗联合免疫实验研究  CNKI文献

    应用自行构建的包含HIV复合表位重组DNA疫苗(pCCMp24)和重组减毒天坛株痘苗病毒(rddVTT-CCMp24),通过小鼠实验开展免疫原性研究.采用肌肉注射方式于第0和21天分别进行初次(prime)和加强(boost)免疫.根据既定的免疫程序...

    刘存霞 杜寿文... 《中国科学:生命科学》 2013年05期 期刊

    关键词: 痘苗病毒天坛株 / 人免疫缺陷病毒 / 重组DNA / prime-boost

    下载(171)| 被引(0)

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