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    3种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立  CNKI文献

    应用靶序列富集多重聚合酶链式反应(t arget-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR)技术建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌3种食源性致病菌的快速检测方法。分别以金黄色葡萄球菌fem A基因、沙...

    刘忠梅 徐义刚... 《食品科学》 2016年04期 期刊

    关键词: 靶序列富集多重PCR方法 / 沙门氏菌 / 金黄色葡萄球菌 / 志贺氏菌

    下载(228)| 被引(11)

    应用DPO-PCR技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7  CNKI文献

    利用双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO)聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7。根据DPO引物设计原则,以肠出血性大肠杆菌O157∶H7 rfbE基因为靶基因设...

    徐义刚 李丹丹... 《食品科学》 2014年08期 期刊

    应用DNA环介导恒温扩增技术快速检测空肠弯曲菌  CNKI文献

    【目的】空肠弯曲菌是一种重要的人畜共患病致病菌,主要经被污染的水源、乳制品、生禽肉进行传播,建立快速、准确的诊断方法是防控空肠弯曲菌感染的重要措施。【方法】本文引入一种新型的核酸检测技术——DNA环介导恒...

    徐义刚 李丹丹... 《中国农业科学》 2012年13期 期刊

    关键词: 空肠弯曲菌 / 环介导恒温扩增 / 快速检测

    下载(269)| 被引(9)

    马铃薯Y病毒株系分类及中国大田马铃薯感染的马铃薯Y病毒株...  CNKI文献

    为了更科学、合理地检测、检疫马铃薯Y病毒(PVY)株系,和全面掌握侵染中国大田马铃薯的PVY株系情况,总结了PVY株系的分类方法,分析了中国大田马铃薯感染的PVY株系谱。认为目前广泛使用的血清型划分法、基因组重组与否划...

    梁五生 温雪玮... 《中国农学通报》 2015年21期 期刊

    关键词: 马铃薯Y病毒 / 病毒株系分类 / 马铃薯 / 中国

    下载(244)| 被引(6)

    基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法  CNKI文献

    目的引入一种设计简易、特异性强、退火温度范围宽的双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO)设计,建立基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法。方法以小肠结肠炎耶尔森氏菌16S-23S rRNA...

    徐义刚 李丹丹... 《中国人兽共患病学报》 2014年05期 期刊

    关键词: 小肠结肠炎耶尔森氏菌 / 16S-23SrRNA / DPO-PCR

    下载(159)| 被引(12)

    食品中单核细胞增生李斯特菌DNA环介导恒温扩增快速检测方法...  CNKI文献

    基于单核细胞增生李斯特菌胞壁质水解酶iap基因,设计两对特异性引物,利用DNA环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,以扩增副产物焦磷酸镁实时浊度为判定标准,建立食品中单核细胞增生李斯...

    徐义刚 崔丽春... 《食品科学》 2012年16期 期刊

    关键词: 单核细胞增生李斯特菌 / iap基因 / 环介导恒温扩增 / 快速检测

    下载(191)| 被引(11)

    应用DPO-PCR方法特异性检测志贺氏菌  CNKI文献

    本研究利用一种高特异性PCR引物设计方法——双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO),以志贺氏菌属侵袭性质粒抗原(ipaH)基因为靶基因,设计DPO引物,建立了特异性检测志贺氏菌属的DPO-PCR方法。结果显示...

    徐义刚 李丹丹... 《中国畜牧兽医》 2014年03期 期刊

    关键词: 志贺氏菌 / 侵袭性质粒抗原(ipaH)基因 / DPO-PCR方法

    下载(145)| 被引(10)

    基于DPO引物的空肠弯曲菌PCR检测方法的建立与初步应用  CNKI文献

    为建立特异、快速检测空肠弯曲菌的方法,本研究针对其gyrA基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了空肠弯曲菌DPO-PCR检测方法。试验结果显示,该方法的检测下限为1.2×102cfu/mL,在48℃~68℃退火温度范围内...

    徐义刚 李丹丹... 《中国预防兽医学报》 2014年04期 期刊

    关键词: 空肠弯曲菌 / gyrA基因 / DPO-PCR

    下载(98)| 被引(11)

    马铃薯A病毒RT-LAMP检测方法的建立  CNKI文献

    马铃薯A病毒(potato virus A,PVA)是一种侵染马铃薯的病毒,严重影响马铃薯的经济价值和产量,为有效防止该有害生物的传入和扩散,建立马铃薯A病毒RT-LAMP检测方法,根据PVA的外壳蛋白基因序列设计RT-LAMP反应的特异引物...

    刘洪义 辛言言... 《中国农学通报》 2015年11期 期刊

    关键词: 马铃薯A病毒 / 反转录-环介导等温扩增 / 检测

    下载(156)| 被引(2)

    靶序列富集多重PCR结合DHPLC同时检测5种食源性致病菌  CNKI文献

    目的建立同时检测沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌5种食源性致病菌的简便、灵敏的高通量方法。方法根据GenBank公布的5种致病菌的特异性靶基因序列,设计5对特异性引物...

    刘忠梅 曾繁华... 《食品安全质量检测学报》 2015年06期 期刊

    番茄黑环病毒RT-LAMP检测方法的建立  CNKI文献

    为了快速有效地检测出植物样品中的番茄黑环病毒(tomato black ring virus,TBRV),根据TBRV的保守序列设计RT-LAMP反应的特异引物,通过试验成功建立了TBRV的RT-LAMP特异性检测方法。该方法检测快速,约27 min即可检测到...

    辛言言 刘洪义... 《河南农业科学》 2015年04期 期刊

    关键词: 番茄黑环病毒 / 反转录-环介导等温扩增 / 检测

    下载(112)| 被引(4)

    黑龙江省部分地区马铃薯Y病毒株系检测  CNKI文献

    从黑龙江省克山、讷河、五大连池和北安大田种植的马铃薯上采集马铃薯病叶,提取总RNA,利用之前验证过的引物,进行反转录、PCR扩增,以及焦磷酸测序,以鉴定感染的马铃薯Y病毒(PVY)株系。结果表明,克山有2个样品分别感染...

    刘洪义 梁五生... 《东北农业大学学报》 2014年01期 期刊

    关键词: 黑龙江省 / 马铃薯 / 马铃薯Y病毒 / 病毒株系鉴定

    下载(154)| 被引(9)

    基于双启动引物特异性检测单核细胞增生李斯特氏菌的PCR方法  CNKI文献

    以单核细胞增生李斯特氏菌iap基因为靶基因,利用一新型PCR引物设计方法--双启动引物(Dual-priming oligonucleotide,DPO),建立了特异性检测单核细胞增生李斯特氏菌的DPO-PCR方法,测试了DPO-PCR方法退火温度不敏感性、...

    徐义刚 李丹丹... 《食品工业科技》 2014年10期 期刊

    关键词: 单核细胞增生李斯特氏菌 / iap基因 / DPO-PCR方法

    下载(103)| 被引(6)

    产肠毒性大肠杆菌DPO-PCR检测方法的建立与应用  CNKI文献

    双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO)是一种新型的引物设计方法,具有设计简易、特异性强以及退火温度范围宽的特点。以产肠毒性大肠杆菌LT基因为靶基因,设计了一对DPO引物,经过对Taq DNA聚合酶、Mg...

    徐义刚 李丹丹... 《中国生物工程杂志》 2013年11期 期刊

    关键词: 产肠毒性大肠杆菌 / LT基因 / DPO-PCR

    下载(116)| 被引(5)

    进境玉米种子中玉米褪绿斑驳病毒的检测鉴定  CNKI文献

    2011年3月,黑龙江出入境检验检疫局技术中心植检室先后接收两批进境的玉米种子,标明来自德国,报验号分别为:11201100021、11201100022,要求检测玉米褪绿斑驳病毒等检疫性有害生物。分别选取300粒种子进行两组室内盆栽...

    刘洪义 刘忠梅... 《东北农业大学学报》 2011年10期 期刊

    关键词: 玉米种子 / 玉米褪绿斑驳病毒 / 外壳蛋白基因 / 序列分析

    下载(183)| 被引(7)

    基于DNA环介导等温扩增技术快速检测溶藻弧菌的研究  CNKI文献

    溶藻弧菌是引起海产鱼类、虾、贝等细菌性疾病的主要病原之一,严重危害水产养殖业的发展,建立快速、准确的检测方法对防控溶藻弧菌及保障水产养殖安全具有重要意义。本研究引入环介导等温扩增(loop-mediated isotherm...

    徐义刚 吴岩... 《中国畜牧兽医》 2013年04期 期刊

    关键词: 溶藻弧菌 / 胶原酶基因 / 环介导等温扩增 / 快速检测

    下载(171)| 被引(4)

    应用DPO技术检测番茄斑萎病毒方法的建立  CNKI文献

    为了准确、高效地检出番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus,TSWV),利用双启动寡核苷酸引物(DPO)技术,以TSWV外壳蛋白(CP)基因为靶基因,设计了一对DPO引物,对PCR反应体系中的引物、d NTPs、Taq DNA聚合酶用量进行优...

    刘忠梅 罗佳... 《河南农业科学》 2017年11期 期刊

    关键词: 番茄斑萎病毒 / 双启动寡核苷酸引物 / DPO-PCR / 检测

    下载(75)| 被引(2)

    13味中药对鸡大肠杆菌的抑菌试验  CNKI文献

    本试验采用煎煮法提取中药中的有效成分,通过测定夏枯草、黄柏、黄连、金银花、大黄、大青叶、穿心莲、五味子、五倍子、黄芩、虎杖、蒲公英和连翘等13种中草药对鸡大肠杆菌的抑菌圈直径和最低抑菌浓度(MIC值),比较各...

    王悦 董荟慧... 《中国兽医杂志》 2013年11期 期刊

    关键词: 中草药 / 鸡大肠杆菌 / 药敏试验 / 琼脂稀释法

    下载(299)| 被引(5)

    猴免疫缺陷病毒抗体免疫梳检测方法的建立及应用  CNKI文献

    目的以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)的SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV的抗体Ig G。方法应用原核表达载体p GEX-4T-1构建SIV SIV30基因的重组表达质粒,并在感受...

    李丹丹 王绥家... 《中国实验动物学报》 2018年02期 期刊

    关键词: 猴免疫缺陷病毒 / SIV30蛋白 / 免疫梳 / 快速检测方法

    下载(36)| 被引(1)

    宁夏固原地区马铃薯M病毒的检测鉴定  CNKI文献

    为了解宁夏固原地区马铃薯M病毒(potato virus M,PVM)发生情况,采集了18份表现叶片变形、茎坏死及植株矮化症状的样品,应用血清学(DAS-ELISA)和分子生物学(RT-PCR)方法进行检测。DAS-ELISA检测结果显示,有2份样品(5号...

    张永江 刘忠梅... 《河南农业科学》 2013年08期 期刊

    关键词: 宁夏固原 / 马铃薯M病毒 / 检测 / 鉴定

    下载(100)| 被引(5)

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